临床生物化学/血气分析仪分析方法

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(一)血标本采集

血气分析标本的收集是极为重要的,若处理不当,将产生很大的误差,甚至比仪器分析的误差还大,因此必须引起足够的重视。

血气标本以采动脉血动脉毛细血管血为主,静脉血也可供作血气测定。只有动脉血才能真实反映体内代谢氧化作用酸碱平衡的状况,对O2检测的有关指标必须采集进入细胞之前的动脉血,也就是血液中从肺部运氧到组织细胞之间的动脉血,才能真正反映体内氧的运输状态。动脉血液的气体含量几乎无部位差异,从主动脉到末梢循环都是均一的。

对PCO2和pH的检测也以采集动脉血为好。血液循环无障碍的病人,静脉血的这两项指标基本也可反映体液酸碱状况。

⒈标本采取方法

⑴动脉血:肱动脉股动脉前臂动脉以及其他任何部位的动脉都可以进行采血。使用玻璃注射器采血,抗凝剂为肝素钠。每支肝素钠每亳升含12500U,相当于100mg,用20ml生理盐水稀释,分装成40支,消毒备用(4℃贮存)。临用时,注射器吸取肝素钠溶液一支,而后将肝素液来回抽动,使针筒局部湿润,多余肝素液全部排出弃之,注射器内死腔残留的肝素液即可抗凝。针刺动脉血管,让注射器内芯随动脉血进入注射器而自动上升,取1-2ml全血即可。拔针后,注射器不能回吸,只能稍外推,使血液充满针尖空隙,并排出第一滴血弃之,让空气排尽,将塑料嘴或橡皮泥封住针头,隔绝空气,再把注射器来回搓滚,混匀抗凝血,立即送检。或者采用微量取样器采集血标本。

⑵动脉化毛细血管血:所谓动脉化的毛细血管血就是指局部组织末梢经45℃温水热敷,使循环加速,血管扩张,局部毛细血管血液中PO2和PCO2值与毛细血管动脉端血液中的数值相近,此过程称为毛细血管动脉化。采血部位以手指耳垂婴儿的手足跟及拇趾为宜。用45℃热水敷局部,5-15min后或直至皮肤发红,而后穿刺,穿刺要深,使血液快速自动流出,弃去第一滴血。不能挤压,挤出的血液的测定结果不可信。未充分动脉化的毛细血管血的PO2测定值偏低,对pH、PCO2和HCO3的测定结果影响不明显。

用肝素锂抗凝比肝素钠好,因为锂含量(3.5%-4.5%)比钠(9.5%-12.5%)少,可减少血中微纤维形成的可能;同时可排除了同一样本测定钠时出现错误的危险,特别是现在一些仪器将血气与电解质测定配套进行,即一份全血既测定血气又测定钠钾氯等电解质。

⑶静脉血:静脉血所测结果不适用于了解体内O2的运输状态,故PO2及有关推算数据仅供参考,对pH及PCO2等酸碱平衡指标是适用的。采静脉血尽可能不使用止血带

⒉注意事项

⑴让病人处于安定舒适状态,卧床5分钟后采血。

⑵在病人进行治疗过程中采血要特别注意:①若进行辅助或人工呼吸时,采血前至少要等20分钟,让其在完全控制自如的人工呼吸状态下采血。②若病人进行氧气吸入时,作血气测定,应注意氧气流量,以备计算出该病人每分钟吸入的氧含量。例如病人吸氧速度为6L/min,吸氧器的呼吸循环纯氧气为3L/min,其余3L为周围空气(PCO2=0.209),因此病人每分钟得到3L纯氧及3×0.21=0.63L来自周围空气的氧气,因此6L总体积中含有3.6L氧气,含量为60%,此时PO2=0.6。③若是体外循环病人,应在血液得到混匀后再进行采血。

⑶抗凝剂以肝素锂为好。对于同时作血气、血钙或血锂的标本,则不能用肝素锂抗凝,因为肝素可与部分钙结合造成误差,此时就要用钙缓冲液肝素试剂抗凝。使用液体肝素抗凝剂浓度为500-1000U/ml为宜,含量过低,抗凝剂体积过大,易造成稀释误差;若含量过高也易引起误差。最好使肝素锂以均匀分布于毛细玻管周边壁上为宜,对标本既无稀释作用又有利于样品的抗凝。

⑷注意防止血标本与空气接触,应处于隔绝空气的状态。因为:①空气中PO2高(21.17kPa或150mmHg)于血液,PCO2低(0.040kPa或0.3mmHg)于血液,一旦血液与空气接触,大气中O2会从高压的空气中进入血液,造成血液PO2高的误差;CO2又会从高压的血液弥散到大气中,使血液PCO2测出结果偏低。大于标本10%的空气气泡会明显影响PO2值。②与空气接触,易造成空气污染血标本。

⑸标本放置时间:采出的全血中有活性红细胞,其代谢仍在继续进行,O2不断地被消耗,CO2不断地产生。有报道标本于体外37℃保存,每10分钟PCO2约增加1mmHg,pH值降低约0.01单位。血样于4℃保存1小时内,其中pH、PCO2值没有明显变化,PO2值则有改变。按要求,采取的血标本应在30分钟内检测完毕,如30分钟后不能检测,应将标本置于冰水中保存,最多不超过2小时,在30分钟到2小时之间,血PO2值是个怀疑值,仅供参考。

⑹采末梢血须是动脉化的毛细血管血,只有高灌注局部组织的代谢变化,其静脉血pH、PCO2、PO2与动脉血所测值才非常接近。

(二)仪器操作简介

目前使用的血气分析仪生产厂家多,型号各异,但性能和操作大同小异。现以AVL995血气酸碱分析仪为例,简要介绍该仪器的使用方法。

AVL945、995装有PO2、PCO2和pH电极,直接测定全血,实际上是测定血浆PO2、PCO2和pH,因为这些电极直接接触的标本是血浆,而未能伸入到红细胞内。测出这三个指标后,再通过仪器运算出其他指标。

⒈启动按仪器要求分别接通主机和空气压缩机电源,使空气压缩机压力到达额定的要求。再开启二氧化碳气瓶,使CO2气流量达到额定要求。分别检查洗涤液、参比液、标准缓冲液1和2等液体是否按要求装备。

⒉定标该机定标分两种形式,即两点定标和一点定标,与其他型号仪器一样可进行总两点自动定标。总两点定标是先用两种缓冲液对pH电极系统进行定标,再用混合后的两种不同含量的气体对PCO2和PO2电极进行定标。两点定标是让仪器建立合适的工作曲线。一点定标是每隔一定的时间检查一下电极偏离工作曲线的情况。开机后,两点定标自动进行是必须做的工作,并且不能中断。进行过两点定标后,仪器每隔12小时左右再自动进行下一次两点定标,必要时可根据情况任意选用定标程序再定标。两点定标后,每隔0.5-3小时,仪器用缓冲液1对pH电极系统进行一点定标。仪器还进行气体定标,先用气体2(CO2)对PCO2电极进行定标,最后用气体1(混合气)对PCO2和PO2电极进行定标。

⒊测量从开机到两点定标完成后,仪器屏幕上显示“READY”,即已准备好,此时可进行测量。一般测量用注射器进样或毛细管进样两种方式进行。

⑴注射器进样:按Syring(注射器)键,转换盘转到进样位置,用注射器慢慢注入血样,直到仪器屏幕显示Measure(测量),下行显示:拔出注射器,按START键。蠕动泵开始转动,将血样吸入测量室。当血样到达pH参比电极时,蠕动泵停转,血样停留在测量室中,仪器自动进行测量和计算。与此同时,输入病人Hb量及体温数、测出的pH、PO2值及其计算值在屏幕显示,并打印结果。由于AVL995Hb能自动测出病人血红蛋白值,这种型号的仪器就可不必另输Hb值,仅输入体温值即可。

测量一结束,仪器自动进行冲洗将血样冲走,干燥后,进行一点定标,然后返回READY状态,又可接着进行第二个样品的测量。

⑵毛细管进样:在仪器处于RDADY状态时,按Capillary键,转换盘转到进样位置。在进样口插入装有血样的毛细管,仪器便自动把血样吸入测量室,并停留在测量室自动进行检测,以下各种步骤与注射器进样法相同。

⑶微量样品测量法:当采集的血量不足40μl而又多于25μl时,仪器自动进行微量样品测量。进样后,仪器屏幕显示“微量样品”,下行显示“只测pH按1,其余按2”;如果还测pH、PCO2和PO2三个参数,需按“2”键。根据测量室血样进入的位置交替按“START键”和“1”键,直至pH测量完。仪器经运算后,即可打印结果。进行微量样品检测时,一定要按血样流动顺序进行,认真操作,其所测值与全量血样检测结果基本一致。

⑷维护和保养:按说明书要求,对仪器要定期保养和维护。特别是对电极的定期保养极为重要。

使用操作人员,一定要熟悉仪器的测定原理、各部件的工作性能,并熟读说明书,一般的故障应该学会处理,既大胆又心细。仪器一旦开机后,应该24小时连续开机使用,充分发挥仪器的效用,做到物尽其用。

32 血气分析仪测定原理及仪器结构 | 血气检测的质量控制 32
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