寄生虫学/寄生虫实验动物保种

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人体寄生虫学

人体寄生虫学目录

寄生虫的动物保种,是将其感染期接种于实验动物,使虫体在动物体内存活,以利于寄生虫与寄生虫病的研究、寄生虫病诊断以及制备教学标本等。

一、杜氏利什曼原虫鞭毛

取患者的前述组织穿刺物,用适量生理盐水稀释后,注射于田鼠(或金黄地鼠)腹腔内,每只鼠注射0.5ml,放笼内饲养。一个月后杀死田鼠,取其肝、脾组织作涂片染色镜检。转种时将感染利肝原虫的田鼠解剖,取其肝、脾置于消毒的组织研磨器中或研钵中,加入少量生理盐水研磨为匀浆后,再加适量生理盐水稀释,用消毒注射器吸取稀释液注射健康田鼠腹腔内,每只鼠注入0.2~0.5ml,继续饲养。3~4周后,按前述方法进行检查。原虫在动物体内可生存数月。

二、刚地弓形虫

经穿刺抽取病人的脑脊液0.5~1ml,注射于体重18~25g的健康小白鼠腹腔内。3周后抽取小白鼠腹腔液作涂片检查(查滋养体)。如为阴性再取肝、脾、脑组织研磨为匀浆,按1:10量加入无菌生理盐水稀释,进行第二次接种。如仍为阴性可用同法进行2~3次,再观察结果。阳性者可作接种传代,每2周一次,以保种。

接种小鼠,每只注射0.3~0.5ml的匀浆。感染后每天观察,即抽取腹腔液涂片,染色后观察。一般感染第四天可见到弓形虫滋养体。

抽取病鼠腹腔液方法,是在其腹部作一切口,用镊子夹提腹部的皮肤腹膜,用1ml注射器吸取1ml生理盐水,迅速注入腹腔,轻揉腹壁,使生理盐水和腹腔液混匀,然后再抽出腹腔液检查。

三、旋毛虫

将感染旋毛虫的小白鼠(或大白鼠)杀死,剥皮,取其肌肉;也可取含有幼虫的猪肉,剪成米粒大小,取1小块肉置在载玻片上压片检查,以含有100~200个幼虫囊包量的肌肉,经口喂健康小白鼠,喂前应饥饿小鼠24小时;或将含有幼虫囊包的肌肉剪碎,置于含有消化液的三角瓶内,一般每1g肌肉加入60ml的消化液,置37~40℃温箱中,经10~18小时(此间经常摇动烧瓶或搅拌),去掉上层液,然后以水洗沉淀法或离心沉淀法收集幼虫。以生理盐水洗涤2~3次,用1ml的注射器和8号针头吸取100~200条幼虫,经腹腔注射或喂饲健康小白鼠(或大白鼠)。感染第5周后,可在鼠肌中(以膈肌、腿部肌多见)可找到幼虫囊包。幼虫在动物体内可生存3个月或半年。

四、血吸虫

1.实验动物一般用18~22g体重的健康小白鼠或2~4kg家兔。

2.尾蚴逸出将阳性钉螺2~3只放入指管(1×7cm)中、加入去氯水或冷开水至管口,管口盖以铜丝网,以防钉螺爬出。置25℃孵育4~12小时,尾蚴可陆续逸出浮于水面。

3.感染动物将小白鼠或家兔仰卧固定在木板上,剪去腹毛,范围约5×5cm约1~2张盖片大小),用清水洗净腹部皮肤。用白金耳沾取液面的尾蚴置于盖玻片上,在解剖镜下计算尾蚴数量。通常感染小白鼠每只条尾蚴,家兔500~800条即可。将含已计数尾蚴的盖片,翻转覆盖在动物腹部的去毛处,使其与皮肤接触,同时在盖片与皮肤之间滴加少许清水,以保持湿润;冬季应保持温度在25℃左右,15~20分钟后取下盖片。感染后约40~45天,即能在动物粪便中查到虫卵。操作中应防止感染,用过器材应消毒。

五、华支睾吸虫

常用实验动物有猫、犬、豚鼠、大白鼠、兔等。取含有华支睾吸虫囊蚴的鱼肉,用人工消化液消化后收集纯净的囊蚴。将囊蚴拌入饲料喂食或直接从口内插入橡皮管注入胃内。感染囊蚴的数量,因动物大小而异,以200~400个为宜。感染后一个月,即可自粪便内检获虫卵。

六、卫氏并殖吸虫

常用实验动物有犬、猫。将感染该种吸虫囊蚴的溪蟹或蝲蛄,放入清水中洗净后,用研钵或绞肉机捣碎,经筛过滤去除粗壳渣,以沉淀法反复清洗至水清。吸出沉渣放在双筒解剖镜下检查,用滴管吸取囊蚴并计数,将定量囊蚴拌入饲料喂动物。也可将囊蚴放入含有2%胆酸盐溶液中,置40℃1小时,使后尾蚴脱囊。用无菌生理盐水洗涤后,给猫或犬进行腹腔注射。幼虫数量以100~300个为宜。约2个月后可在粪便中检出虫卵。

注:人工消化液配方

盐酸 0.4ml胃蛋白酶 25g蒸馏水100ml

32 寄生虫人工培养 | 寄生虫标本的保存 32
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