厌氧培养

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厌氧培养 anaerobic culture 指把微生物置于与分子态氧隔绝状态下所进行的培养。专性厌氧细菌不这样培养就不能生长发育,但在实验条件下,有时也把兼性厌氧细菌也进行这样培养。由于目的不同而有种种培养方法,可分为以下几大类:

(1)与空气隔绝或尽量少接触空气的培养法:在三角瓶瓶颈以下装满液体培养基,通过煮沸把溶解的空气赶出后,立即冷却进行细菌接种。由于发酵而产生H2和CO2时,就可进一步确认是厌氧细菌。另外,把琼脂培养基加入普通试管约10厘米高度进行穿刺培养,或移植于液体培养基和固体斜面培养基上以后,再加一层液体石腊或矿物油,用这些方法可防止与空气接触。(2)除掉空气的方法:把微生物装入耐压容器中进行真空培养,或充满二氧化碳、氢气、氮气、氩气等。这些气体可把事先混入的微量氧气除掉。在氢存在时,可用置换后飞溅火花等方法来除掉残存的氧气(3)去氧的方法:使用碱性邻苯 三酚(pyrogallol) 、黄磷、金属铬和稀硫酸进行化学除氧,或使用好氧细菌及发芽的种子,使通过呼吸而消耗掉氧气。(4)在培养基中加入还原剂(如0.1%的巯基乙酸钠盐,0.01%的硫化钠等)。以上各种方法进行适当组合就能进一步确认厌氧细菌。为了确定厌氧性,可在碱性条件下加入葡萄糖并加热,与配制的还原型次甲蓝美蓝)溶液一起加入,保持脱色状态即可。

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