重组率

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重组率

1、遗传学重组率

交换值(重组率):指同源染色体的非姊妹染色单体间有关基因染色体片段发生交换的频率,一般利用重新组合配子数占总配子数的百分率进行估算。

交换值(%)=(重新组合配子数/总配子数)×100

交换值的幅度经常变化于0-50%之间:

影响交换值的因子:

1).性别:雄果蝇、雌蚕中未发现染色体片段发生交换;

2).温度:家蚕第二对染色体上PS-Y(PS黑斑、Y幼虫黄血)

饲养温度(℃) 30 28 26 23 19

交换值(%) 21.48 22.34 23.55 24.98 25.86

3).基因位于染色体上的部位:离着丝点越近,其交换值越小,着丝点不发生交换。

4).其它:年龄、染色体畸变等也会影响交换值。

2、基因工程学重组率

重组率:连接反应结束后,含有外源DNA片段的重组分子数与加入的载体分子数之比。较为理想的重组率为25-75%

提高重组率的方法:

连接反应条件 外源片段:载体=2:1-10:1(分子数),增加碰撞机会,减少自身环化。

载体除磷 (磷酸酯酶5’除磷)。

TdT在3’端增加人工粘性末端,防止载体自我环化 。

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