医用化学/比色分析的测量方法

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无论是光电比色计还是分光亮度计,最常用的测量方法有如下两种。

(一)标准曲线计

先配制一系列不同浓度的标准溶液,用选定的显色剂显色。选用合适波长的入射光(光电比色计用滤光片,分光亮度计可转动波长调节器)。测定时先以空白溶液调节透光率100%,然后分别测定标准系列的吸亮度。以吸亮度为纵坐标,浓度为横坐标作图得到一条通过原点的直线,叫做标准曲线(或称工作曲线)。

例如,测定维生素B12时,可预先绘制维生素B12的A-c标准曲线(图8-11),再用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸亮度,即可从标准曲线上找出被测溶液的浓度或含量。

这种方法叫做标准蛐线法。标准曲线可在固定仪器和方法的条件下多次使用,适合于经常性工作。但若仪器不同或测定方法及条件改变,测得的标准曲线不同。因此在更换任何测定条件时都需重新绘制标准曲线。

维生素B12的标准曲线


图8-11 维生素B12的标准曲线

(二)直接比较计算法

若仅对个别样品进行测定,且A-c曲线线性良好,可水作标准曲线而直接比较测定结果。

先配制一个被测物质溶液浓度相近的标准溶液,与被测溶液在相同条件下测定吸光度。根据下式可以计算。

A=Kcb

A=Kcb

由于使用同一波长的入射光,采用同样的比色皿,测定同样的物质。所以

K=K

b=b

因此A/A=c/c

则c=A/A×c

32 比色测量仪器 | 比色分析应用示例——铁的含量测定 32
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