Coombs试验

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Coombs试验抗人球蛋白试验,是检测血液中温反应性抗体的一种方法,也是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要指标。温抗体中50%以上由IgG介导,其次为IgM,IgA和C3d等,因此本试验应分选各种单克隆抗体同时测定。Coombs试验分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应):直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体;间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体

目录

原理

不完全抗体(IgG)无法架接2个邻近的红细胞而只能和一个红细胞抗原相结合。抗人球蛋白抗体是完全抗体,可与多个不完全抗体的Fc段相结合,导致红细胞凝集现象,称为抗人球蛋白试验阳性。直接Coombs试验阳性说明病人红细胞表面上包被有不完全抗体(比如IgG)。而间接Coombs试验阳性则说明病人血清中存在不完全抗体。


方法

(1)直接coombs试验 :是测定吸附在红细胞膜上的不完全抗体补体较敏感的方法,是诊断AIHA的重要依据。在生理盐水内,吸附不完全抗体或补体的致敏红细胞并无凝集,因为不完全抗体是单价的。加入完全、多价的抗人球蛋白抗体后,后者与不完全抗体Fc段相结合,起搭桥作用,可导致致敏红细胞相互凝集,即直接Coombs试验阳性。根据加入的抗人球蛋白不同,可鉴别使红细胞致敏的是IgG抗体还是C3。

直接Coombs试验.jpg

(2)间接coombs试验:用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中,如果抗原抗体相应则发生结合,再加入抗球蛋白抗体,则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh(D)抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等,分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。

间接Coombs试验.jpg

参考值

直接和间接Coombs’试验均为阴性,也就是说正常人这两个试验都应该是阴性。

临床意义

1.阳性:见于新生儿溶血病自身免疫性溶血性贫血AIHA)、SLE类风湿性关节炎恶性淋巴瘤、甲基多巴及青霉素型等药物性溶血反应。

2.AIHI大多属于温抗体型(即于37°C条件下作用最强,主要为IgG),但也有小部分属于冷抗体型(主要为IgM),故必要时于4°C条件下进行试验,排除假阴性反应。

3.AIHA大多为IgG型抗体,还有IgG+C3型等,故应使用广谱的抗人球蛋白血清进行试验


参考文献

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