克隆载体

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克隆载体(Cloning Vector):通常采用从病毒质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒,噬菌粒酵母人工染色体

对载体的要求:①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力。

②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好。

③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点

④容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。

⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作

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