临床生物化学/细胞调节因子实验室检测的简介

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临床生物化学

临床生物化学目录

研究细胞因子在各种病理生理情况下的活动、分泌以及在治疗中使用细胞因子制剂的效应,都要求能有效地检测体内细胞因子的含量(浓度水平),以及检测细胞因子的功能(生物效应)。

从前以细胞因子的生物学特征作为其含量分析的基础,免疫分析及其它免疫化学或生物化学技术亦可用于此细胞因子的测定和部分鉴定,表2-14总结了已用于细胞因子功能测定和浓度(含量)测定的方法。

表2-14 细胞因子分析

生物分析 酶联免疫附分析(ELISA)
动物分析 其它
增殖分析 受体结合分析
骨髓集落形成分析 免疫化学程序
细胞毒性细胞稳定性分析 细胞或细胞中的测定
抗病毒分析 匀浆生物分析或免疫分析
次级分子分泌的诱导 免疫组化或免疫细胞分析
趋化作用化学促进作用分析 流式细胞计数
细胞因子分泌活性的抑制 酶联免疫印迹(ELISPOT)
免疫分析 反相溶血斑分析
放射免疫分析(RIA) 细胞因子mRNA原位杂交
免疫放射光谱分析(IRMA)

人细胞因子实验测定的标准化:人细胞因子的实验测定中仍存在诸多问题,选择分析方法不恰当则可能导致混乱甚至错误的结论。有时有必要同时选择几种方法分析某些细胞因子。生物分析方法特异性差,那些使用细胞株的生物分析可能与不同细胞因子反应,而且可受非细胞因子分子的影响。用于维持细胞生物的细胞因子能强烈地影响某些依赖细胞对一些细胞因子的反应程度。有的细胞在连续传代后可能失去对某些细胞因子的反应性,此外,由于抑制剂如受体拮抗剂、可溶性细胞因子受体或其他拮抗剂分子的存在,测得细胞因子活性结果可能会比实际活性偏低。

由于蛋白酶的存在或与抑制剂如可溶性受体形成复合物,免疫分析能测得失去生物活性或具部分生物活性的细胞因子分子,并可受到基质效应的影响。此外,特异性问题影响了细胞因子mRNA测定,而mRNA水平亦不一定与具生物活性的细胞因子水平相一致。其它影响自动免疫分析方法准确性的问题还包括抗体的选择、分析的不均匀、分子糖基化的不同、寡聚体的形成及循环受体的影响,虽然免疫分析的结果并不一定反映细胞因子的生物活性,但一般而言,免疫分析及其它配体结合分析都更容易标准化。

目前,英国已能提供下列细胞因子的标准化参考试剂:IL-1α,IL-1β,IL-2-9,GM-SCF,M-CSF,TGF-α,TGF-β,TGF-γ,SCF,LIF(白血病抑制因子),IFN-α1,IFN-α2b,IFNγ,还能供应IFN-α2a,IFN-β及IFN-γ的国际标准。但于细胞因子分子的不均匀,其分析的标准化仍是问题。因此,要求各实验室的细胞因子分析应参考国际标准。某些细胞因子具有易被破坏的特性,从而要求非常细致和标准化的取样。

随着细胞因子在治疗上的不断应用,其测定方法亦得到了广泛的发展,临床检师必须选用正常的分析方法支持临床医生,为临床诊断提供相对简易的实验程序和准确的操作技术。

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